Бейлез

Автор(ы): Под ред. Финдлея Дж. Б., Уванза У. Г.

26.05.2010

Год изд.: 1990
Описание: Книга международного коллектива авторов (Англия, США, Швейцария, ФРГ) знакомит с современными практическими подходами к исследованию мембран животных и растительных клеток. Подробно описаны методы выделения, фракционирования и реконструкции мембран, анализ их компонентов (химический, физический и иммунологический). Рассматриваются источники возможных ошибок и артефактов. Книга предназначена для биохимиков, биофизиков, иммунологов.
Оглавление: Предисловие редактора перевода [5]
Предисловие [7]
Список авторов [9]
Список сокращений [11]
Глава 1. Органеллы и мембраны животной клетки. У. Говард Эванз [13]
  1. Введение [13]
  2. Методы выделения [13]
    2.1. Недеструктивные методы [13]
    2.2. Методики, включающие разрушение клеток [17]
  3. Разделение субклеточных компонентов [19]
    3.1. Центрифугирование [19]
    3.2. Разделение в двухфазной системе, содержащей два полимера [32]
    3.3. Проникающая (адсорбционная) хроматография [35]
    3.4. Электрофорез [35]
    3.5. Иммуноаффинные методы [37]
  4. Идентификация и оценка чистоты субклеточных фракций [38]
    4.1. Определение ферментов-маркеров [38]
    4.2. Выбор маркеров и критерии их использования [39]
  5. Выделение различных органелл и мембранных систем [41]
    5.1. Ядра и ядерные мембраны [41]
    5.2. Митохондрии [42]
    5.3. Лизосомы [43]
    5.4. Пероксисомы [44]
    5.5. Аппарат Гольджи [45]
    5.6. Окаймленные везикулы [47]
    5.7. Эндосомы (эндоцитозные везикулы) [49]
    5.8. Плазматические мембраны [51]
  6. Заключение и перспективы [55]
  Литература [56]
Глава 2. Мембранные фракции растительных клеток. Д. Джеймс Мерре, Эндрю О'Брайтман, Анна Стина Санделиус [62]
  1. Введение [62]
  2. Приготовление гомогената [64]
    2.1. Среда для гомегенизации [64]
    2.2. Методы гомогенизации [64]
    2.3. Удаление клеточных стенок и крупных обломков [65]
    2.4. Стабилизация гомогената [65]
  3. Основные подходы к разделению мембран [66]
    3.1. Дифференциальное центрифугирование и центрифугирование в градиенте плотности [67]
    3.2. Распределение в водных двухфазных системах [69]
    3.3. Препаративный электрофорез в свободном потоке [71]
  4. Идентификация клеточного компонента и критерии его очистки [73]
  5. Распределение маркеров и их выход [79]
  6. Морфология и морфометрия [81]
    6.1. Фиксация [82]
    6.2. Негативное контрастирование [82]
  7. Плазматическая мембрана и тонопласт [83]
    7.1. Маркеры плазматических мембран растительных клеток [84]
    7.2. Выделение плазматических мембран с помощью распределения в водной двухфазной системе [85]
    7.3. Выделение и идентификация тонопластов [85]
    7.4. Тонопластные везикулы, обладающие транспортной активностью (замкнутые везикулы) [87]
    7.5. Выделение тонопластной и плазматической мембран с помощью последовательного центрифугирования в градиентах плотности сахарозы и глицерола [87]
    7.6. Разделение плазматической мембраны и тонопласта с помощью электрофореза в свободном потоке [89]
  8. Митохондрии [89]
  9. Эндоплазматический ретикулум [91]
  10. Аппарат Гольджи [93]
  11. Пластиды [94]
    11.1. Хлоропласты [94]
    11.2. Субфракции хлоропластов [95]
    11.3. Этиопласты [96]
    11.4. Субфракционирование этиопластов [97]
    11.5. Амилопласты [97]
    11.6. Хромопласты [98]
    11.7. Пластоглобулы [99]
  12. Ядра и ядерные оболочки [99]
    12.1. Ядерные оболочки [100]
    12.2. Хроматин и ядрышко [100]
  13. Микротельца [101]
  14. Окаймленные везикулы [102]
  15. Заключительные замечания [102]
  Литература [103]
Глава 3. Иммунологические методы исследования мембран. Элейн М. Бейлез, Питер Дж. Ричардсон, Дж. Пол Лузио [109]
  1. Введение [109]
  2. Получение поликлональных и моноклональных антител к компонентам мембран [109]
    2.1. Достоинства и недостатки поликлональных и моноклональных антител [109]
    2.2. Иммунизация животных для получения поликлональных антител [111]
    2.3. Получение моноклональных антител [112]
    2.4. Скрининг моноклональных антител [113]
  3. Иммуноблоттинг и анализ эпитонов [123]
  4. Иммунологическая очистка субклеточных фракций [127]
    4.1. Антитела, использующиеся при субклеточном фракционировании [128]
    4.2. Носители для иммуноаффинного субклеточного фракционирования [131]
    4.3. Практические вопросы и возможности применения иммуноаффинного выделения клеточных органелл [132]
  5. Иммунологическое выделение мембранных компонентов [134]
    5.1. Солюбилизация мембранных белков [134]
    5.2. Очистка мембранных белков на иммуносорбентах [137]
  6. Использование антител для отбора комплементарных ДНК, кодирующих мембранные белки [141]
    6.1. Фаговые векторы [142]
    6.2. Плазмидные векторы [142]
    6.3. Скрининг [143]
    6.4. Перспективы [145]
  7. Благодарности [146]
  Литература [146]
Глава 4. Разделение и анализ липидных компонентов мембран. Джоан А. Хиггинс [150]
  1. Введение [150]
  2. Экстракция липидов [151]
    2.1. Растворители и аппаратура [151]
    2.2. Экстракция осадка мембран или небольших объемов концентрированных суспензий [152]
    2.3. Подкисление растворителя для липидной экстракции [153]
    2.4. Экстракция больших объемов мембранной суспензий [153]
    2.5. Удаление растворителя из липидного экстракта [154]
  3. Разделение липидов по классам [156]
    3.1. Общие вопросы применения ТСХ [157]
    3.2. Системы растворителей для разделения мембранных липидов [160]
    3.3. Разделение полифосфоинозитидов и их производных [165]
    3.4. Обнаружение липидов на пластинках для ТСХ [169]
  4. Количественное определение липидов после разделения их с помощью ТСХ [171]
    4.1. Элюирование липидов [171]
    4.2. Определение фосфолипидов [172]
    4.3. Определение сложных эфиров [174]
    4.4. Определение холестерола и его эфиров [175]
    4.5. Определение свободных жирных кислот [176]
  5. Исследование трансмембранного распределения липидов [177]
    5.1. Мембранные препараты [178]
    5.2. Проницаемость микросомной мембраны [178]
    5.3. Сохранение структурной организации микросомных мембран [182]
  6. Определение трансмембранного распределения фосфолипидов с помощью гидролитических ферментов [184]
    6.1. Общие принципы [184]
    6.2. Фосфолипазы [184]
    6.3. Методика [184]
  7. Выяснение трансмембранного распределения фосфолипидов с помощью химических модифицирующих реагентов [186]
    7.1. Принцип метода [186]
    7.2. Методика [187]
  8. Выяснение трансмембранного распределения фосфолипидов с помощью фосфолипидобменивающих белков [188]
    8.1. Принцип метода [188]
    8.2. Белкн, участвующие в обмене фосфолипидов [188]
    8.3. Акцепторные мембраны [189]
    8.4. Радиоактивное мечение донорной мембраны [189]
    8.5. Приготовление липосом [190]
  9. Изучение биосинтеза, круговорота и внутриклеточного транспорта мембранных фосфолипидов [192]
    9.1. Включение меченых предшественников в фосфолипиды [192]
    9.2. Определение локализации новосинтезированных фосфолипидов [194]
  Литература [194]
Глава 5. Солюбилизация и реконструкция мембранных белков. Оуен Т. Джонс, Юли П. Эрнест, Марк Дж. Мак-Нэми [196]
  1. Введение [196]
  2. Солюбилизация мембранных белков [198]
    2.1. Критерии солюбилизации [198]
    2.2. Выбор детергента [202]
    2.3. Факторы, влияющие на стабильность солюбилизированных мембранных белков [208]
    2.4. Солюбилизация и очистка никотинового ацетилхолинового рецептора из Torpedo catifornica [213]
  3. Общая стратегия реконструкции мембранных белков [214]
    3.1. Общие методы реконструкции [214]
    3.2. Морфологическая характеристика везикул [218]
    3.3. Факторы, определяющие морфологию реконструированных мембран [221]
    3.4. Характеристика реконструированных везикул [226]
    3.5. Реконструкция ацетилхолинового рецептора [231]
  4. Определение функциональной активности реконструированных мембран [232]
    4.1. Определение связывания и ферментативной активности [232]
    4.2. Методы регистрации транспорта и проницаемости [239]
    4.3. Общие замечания [245]
  5. Новые возможности применения реконструированных мембран [246]
    5.1. Использование реконструированных мембран для изучения структуры белков [246]
  6. Заключительные замечания [247]
  Литература [248]
Глава 6. Выделение и модификация мембранных белков и пептидов. Джон Б. Финдлей [251]
  1. Введение [251]
  2. Солюбилизация мембранных белков [251]
    2.1. Периферические белки [252]
    2.2. Интегральные белки [252]
  3. Хроматографическое разделение белков [256]
    3.1. Разделение по размеру [256]
    3.2. Разделение по заряду [259]
    3.3. Гидрофобная хроматография [262]
    3.4. Аффинная хроматография [264]
  4. Гель-электрофорез [270]
    4.1. Извлечение белка из геля [271]
  5. Анализ мембранных белков [273]
    5.1. Расщепление белка [275]
    5.2. Определение концентрации белка [277]
  6. Ковалентная модификация белков [279]
    6.1. Реагенты, модифицирующие поверхностные белки [280]
    6.2. Гидрофобные реагенты [288]
    6.3. Амфифильные реагенты [289]
    6.4. Сшивающие реагенты [291]
  7. Радиационная инактивация [301]
  8. Заключение [303]
  Литература [303]
Глава 7. Оптическая спектроскопия биологических мембран. К. Линдсей Башфорд [308]
  1. Введение [308]
  2. Постановка эксперимента [310]
    2.1. Оборудование [310]
    2.2. Выбор хромофора [313]
    2.3. Характеристика и калибровка оптических сигналов [315]
    2.4. Артефакты [315]
    2.5. Низкотемпературная спектроскопия [319]
  3. Примеры [320]
    3.1. Окислительно-восстановительное состояние митохондрий in situ [320]
    3.2. Мембранный потенциал органелл и клеток [323]
    3.3. рН клеточных компартментов [328]
    3.4. Поверхностный потенциал мембран [335]
  4. Перспективы [336]
  5. Благодарности [336]
  Литература [336]
Глава 8. Биофизические подходы к изучению биологических мембран. Дитер Шуберт [339]
  1. Введение [339]
  2. Размеры, форма и конформация мембранных белков и их комплексов [339]
    2.1. Молекулярная масса мономерных белков или субъединиц [340]
    2.2. Молекулярная масса белковых комплексов [340]
    2.3. Размеры молекул [344]
    2.4. Конформация полипептидной цепи [348]
    2.5. Подвижность участков белковой молекулы [353]
  3. Структура липидов в составе биологических мембран и модельных систем [353]
    3.1. Обнаружение фазовых переходов [354]
    3.2. Структура фаз [356]
    3.3. Разделение фаз и доменная структура [361]
    3.4. Подвижность углеводородных «хвостов» липидных молекул [363]
  4. Вращательная, латеральная и трансбислойная диффузия белков и липидов [365]
    4.1. Вращательная диффузия белков [365]
    4.2. Вращательная диффузия липидов [369]
    4.3. Латеральная диффузия белков [370]
    4.4. Латеральная диффузия липидов [371]
    4.5. Трансбислойная диффузия липидов [373]
  5. Взаимодействия белок — липид [376]
    5.1. Характеристика белково-липидного связывания [376]
    5.2. Влияние липидов на структуру белка [382]
    5.3. Влияние белка на структуру и подвижность липидов [383]
  6. Перспективы [385]
  7. Благодарности [385]
  Литература [386]
Приложение I. Свойства материалов, используемых для разделения в градиенте плотности [390]
  Литература [393]
Приложение II. Ферменты — маркеры субклеточных фракций [394]
  Литература [395]
Приложение III. Анализ рецепторов. А. Сивапрасадарао, Джон Б. Финдлей [396]
  1. Мембраносвязанные рецепторы [396]
    1.1. Реагенты [397]
    1.2. Методика [397]
  2. Растворимые рецепторы [398]
    2.1. Реагенты [398]
    2.2. Методика [399]
  Литература [399]
Приложение IV. Реагенты, используемые для модификации белков [400]
  Литература [402]
Приложение V. Электрофорез со сдвигом заряда [403]
  Методика [403]
  Литература [404]
Приложение VI. Анализ инозитолфосфатов методом ВЭЖХ [405]
  Литература [406]
Размер: 5919306 байт
Язык: РУС
Формат: djvu
Ссылка 1: скачать
Скачивание без каких-либо ограничений по каналу 100М.
Рейтинг: 22
Биологические мембраны. Методы — обложка книги.

Источник: http://www.nehudlit.ru/books/detail737515.html